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本文標(biāo)題："細(xì)胞質(zhì)量濃度的測(cè)定，細(xì)胞干重測(cè)定技術(shù)"
新聞來(lái)源：未知 發(fā)布時(shí)間：2016-12-21 0:32:20 本站主頁(yè)地址：http://www.y7853.cn
細(xì)胞質(zhì)量濃度的測(cè)定，細(xì)胞干重測(cè)定技術(shù)
測(cè)定細(xì)胞質(zhì)量濃度
直接法 對(duì)于細(xì)胞質(zhì)量濃度的測(cè)定，細(xì)胞干重測(cè)定是最常用的
直接法，并且僅能用于在不含固體顆粒的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的細(xì)胞。如
果存在非細(xì)胞固體物(如糖蜜固體、纖維素或玉米漿)，那么干重測(cè)
量則不準(zhǔn)確。通常培養(yǎng)液的樣品要經(jīng)過(guò)離心或過(guò)濾，并用緩沖液或
水進(jìn)行洗滌。洗后的濕細(xì)胞在80℃下干燥24h，然后測(cè)定細(xì)胞干重
。
填充細(xì)胞體積法用于發(fā)酵液中(例如工業(yè)抗生素發(fā)酵)細(xì)胞濃度
的快速粗略估計(jì)。在標(biāo)準(zhǔn)條件下(一定的轉(zhuǎn)速和時(shí)間)發(fā)酵液在錐形
刻度管中被離心，進(jìn)而測(cè)量細(xì)胞體積。
另一種快速方法是基于樣品培養(yǎng)基中懸浮細(xì)胞對(duì)光的吸收。光
的強(qiáng)度用分光光度計(jì)測(cè)定。當(dāng)沒(méi)有其他固形物或吸光化合物存在時(shí)
，測(cè)量培養(yǎng)液的濁度或光密度是一種快速、廉價(jià)、簡(jiǎn)單的細(xì)胞濃度
估計(jì)方法。樣品室中透光強(qiáng)度是細(xì)胞濃度和樣品室寬度的函數(shù)。光
的傳播由吸收和散射二者來(lái)調(diào)節(jié)。有顏色的細(xì)胞與無(wú)顏色的細(xì)胞結(jié)
果不同。必須考慮培養(yǎng)基中組分的本底吸收，特別是光吸收的溶解
物進(jìn)入細(xì)胞時(shí)。培養(yǎng)基應(yīng)該基本上沒(méi)有顆粒。正確的程序需要：使
用培養(yǎng)基組分具有最小光吸收的波長(zhǎng)(通常使用600 700nm)，和培
養(yǎng)基相對(duì)照的“空白”，以及使用校準(zhǔn)曲線(xiàn)。以光密度(0D)與干重
測(cè)量的關(guān)系作校準(zhǔn)曲線(xiàn)。校準(zhǔn)曲線(xiàn)在高OD值時(shí)(>0．3)可能呈非線(xiàn)
性，同時(shí)在某種程度上還與細(xì)胞的生理狀態(tài)有關(guān)。
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