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植物體內(nèi)含有許多種化學(xué)物質(zhì)。在得到植物組織切片之后,可以通
過(guò)組織化學(xué)(顯微化學(xué))染色的方法使不同類型的化學(xué)成分在顯微鏡
下得以顯示,從而了解這些物質(zhì)在植物的組織、細(xì)胞內(nèi)的空間分布
。用于組織化學(xué)研究的切片,根據(jù)研究對(duì)象和所要檢測(cè)的化學(xué)物質(zhì)
的不同,可采用石蠟切片,有時(shí)要求新鮮材料采用徒手切片或冰凍
切片。在植物組織切片過(guò)程中恰當(dāng)?shù)剡\(yùn)用一些簡(jiǎn)單的組織化學(xué)染色
方法,一方面可以確定細(xì)胞壁及細(xì)胞后含物的化學(xué)性質(zhì),另一方面
也有利于分辨組織和細(xì)胞的結(jié)構(gòu)。
顯示細(xì)胞壁化學(xué)組成的方法
(1)纖維素:植物細(xì)胞的細(xì)胞壁中最主要的成分是纖維素。常
用的顯色方法為碘一硫酸法:取1%的碘一碘化鉀溶液滴加在材料
上,再加1滴66.5%的硫酸,纖維素細(xì)胞壁與碘和硫酸作用而變成
藍(lán)色。在細(xì)胞中,纖維素的成分愈多和其他后來(lái)參加組成細(xì)胞壁的
成分愈少,則藍(lán)色愈明顯;在次生壁中,纖維素已為木質(zhì)素等覆蓋
j不變藍(lán)色。
(2)木質(zhì)素:木質(zhì)素是以苯丙烷為結(jié)構(gòu)單元通過(guò)醚鍵一碳鍵彼
此連接成具有三維空間結(jié)構(gòu)的高聚物。因?yàn)橹参锛?xì)胞壁上的木質(zhì)都
成復(fù)合的狀態(tài),木質(zhì)素的顯微化學(xué)方法雖然很多,但一般只能示知
其存在的可能性而已。間苯三酚反應(yīng)是植物顯微化學(xué)中確定木質(zhì)化
的最常用和最簡(jiǎn)單方法:切片先用l滴鹽酸浸透,然后,滴上1滴5
%~10%的間苯三酚酒精溶液,木質(zhì)化細(xì)胞壁可現(xiàn)出櫻紅色或紫紅
色(因顏色會(huì)慢慢褪去而不宜制作永久制片)。染色稍為穩(wěn)固的方法
為硫酸苯胺(或鹽酸苯胺)法:在切片上滴上1滴硫酸苯胺試劑(硫酸
苯胺19,蒸餾水70mL,95%酒精30mL,硫酸30mL),木質(zhì)化的細(xì)胞
壁現(xiàn)出鮮黃色或姜黃色,可制成保持期稍久的永久制片。
(3)栓質(zhì)和角質(zhì):栓質(zhì)和角質(zhì)都是特種高分子飽和或不飽和脂
肪酸的衍生物。用碘一硫酸或碘一氯化鋅法染色,栓質(zhì)和角質(zhì)都可
顯黃色或淺褐色,但木質(zhì)、半纖維素等成分也被染成同樣的顏色。
用蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)染色,栓質(zhì)和角質(zhì)呈現(xiàn)橘紅色反應(yīng),不過(guò)這種
反應(yīng)也并非栓質(zhì)和角質(zhì)的特異性反應(yīng)。
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