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莢膜是圍在細(xì)菌細(xì)胞外面一層粘液性多糖類物質(zhì)
了解細(xì)菌菌落的特征。
基本原理
莢膜是包圍在某些細(xì)菌細(xì)胞外面的一層粘液性多糖類物質(zhì)。莢
膜與染料結(jié)合力很弱,不易著色,故常用襯托染色法,即將菌體和
背景著色,而把不著色且透明的莢膜襯托出來。由于莢膜很薄,且
含大量水分,因此,制片時(shí)一般不用熱固定。
細(xì)菌的大小,可在
顯微鏡下用測微尺進(jìn)行測量。目鏡測微尺是
一塊圓形玻片,在中央刻有5mm長的等分線。測量時(shí),將其放在顯
微鏡接目鏡的隔板上。由于不同顯微鏡的放大倍數(shù)不同,故目鏡測
微尺每格實(shí)際代表的長度隨顯微鏡的放大倍數(shù)不同而異,在使用前
須用鏡臺(tái)測微尺校正,以求得一定接物鏡及接目鏡等光學(xué)系統(tǒng)下,
目鏡測微尺每格實(shí)際測量時(shí)的長度。鏡臺(tái)測微尺是中央部分刻有精
確等分線的載玻片。一般將1毫米等分為100格,每格等于0.01mm(
10微米)。它是專用于校正目鏡測微尺每格長度的。
不同種類的細(xì)菌菌落,在其形態(tài)、大小、色澤、透明度、粘稠
度、致密度以及邊緣情況等方面都有所差異,菌落形態(tài)特征是區(qū)分
和鑒別細(xì)菌種類的重要依據(jù)之一。這種方法簡便快速,特別在菌種
篩選和辨認(rèn)等方面應(yīng)用廣泛。
三、器材
目鏡測微尺鏡臺(tái)測微尺顯微鏡放大鏡等
黑色素溶液95%酒精石炭酸復(fù)紅染色液
圓褐固氮菌枯草桿菌金黃色葡萄球菌大腸桿菌的平板菌落枯草
桿菌金黃色葡萄球菌染色玻片標(biāo)本
四、實(shí)驗(yàn)步驟
1. 幾種細(xì)菌菌落形態(tài)的觀察用放大鏡觀察圓褐固氮菌。金黃
色葡萄球菌、枯草桿菌、大腸桿菌菌落的大小、形態(tài)、色澤,透明
度、粘稠度以及邊緣情況。
2. 莢膜染色
(1)在干凈的載玻片中央,滴加蒸餾水少許。
(2)按無菌操作要求用接種環(huán)挑取培養(yǎng)2—3天的圓褐固氮菌制
成涂片,晾干(不可用火焰烘干)。
(3)加95%酒精1滴固定(不可加熱固定)。(4)加石炭酸復(fù)紅染
液染色3—4分鐘,水洗。
(5)滴l滴黑素于載玻片一端,另取一塊邊緣光滑的載玻片+
與黑素接觸,再以勻速向涂片推動(dòng),通過涂片使成一均勻的薄層
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