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常用細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)圖像
顯微鏡-DNA指紋在培養(yǎng)
細(xì)胞DNA指紋檢查
DNA中包含沒有翻譯功能的衛(wèi)星DNA區(qū)域,這些區(qū)域的功能尚不
清楚,可能為單純結(jié)構(gòu)性的或是為今后基因進(jìn)化提供一個(gè)潛在編碼
區(qū)域的存儲(chǔ)部位。然而不論其功能如何,這些區(qū)域并非高度保守,
因?yàn)樗鼈儾晦D(zhuǎn)錄,并產(chǎn)生高度變異區(qū),當(dāng)其DNA被特異的限制性內(nèi)
切核酸酶酶切后,可用與這些高度可變區(qū)域雜交的cDNA探針探查。
電泳可顯示片段長度的變異[限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)],這種
多態(tài)性對(duì)DNA來源的個(gè)體具有特異性。通過聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)
行分析時(shí),每個(gè)個(gè)體的DNA用放射性探針進(jìn)行的放射性自顯影顯示
出特異的雜交式樣,這些式樣現(xiàn)被稱為DNA指紋(finger printing)
,而且是細(xì)胞特異的,但來自同一個(gè)體的多種細(xì)胞系或來自高度近
交不同供體動(dòng)物的細(xì)胞除外。
DNA指紋在培養(yǎng)中非常穩(wěn)定,來自相同起源的細(xì)胞系,分別在
不同實(shí)驗(yàn)室里使用多年,仍然具有相同或非常相近的DNA指紋。如
果原始細(xì)胞系或源自該細(xì)胞系或某個(gè)體的DNA被保留,而且強(qiáng)調(diào)需
要保存其組織,血液或從原代培養(yǎng)分離的DNA標(biāo)本,則指紋技術(shù)成
為決定細(xì)胞系起源的一種非常有用的工具,此外如果懷疑有交叉污
染,則可以通過指紋技術(shù)對(duì)這種細(xì)胞或所有潛在的污染源加以肯定
或否定。DNA指紋技術(shù)已確認(rèn)了早期的同工酶和染色體核型的資料
,表明許多常用細(xì)胞系已與HeLa細(xì)胞系發(fā)生了交叉污染。
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