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電鏡樣品的染色在電鏡下觀察樣品,不能像在光學顯微鏡下利用
各種不同的染色技術(shù)來分辨不同組織及其組分,只能根據(jù)樣品不同
部位的反差來觀察。一般決定反差的兩個主要因素是對象的電子散
射能力及其厚度:生物對象所含有的碳、氫、氧、氮的散射能力很
低,不能使它們產(chǎn)生適當?shù)姆床睿d膜散射電f的能力與對象的
差別不大,因此很難區(qū)分結(jié)構(gòu)的細節(jié);象噬菌體和病毒一類生物體
的厚度較小,因而反差也特別低。為了增加某種組分的反差,在制
備樣品中加人選定的重金屬沉積或附著在一定部位,使與其周同和
背景造成明顯的反差。從而能觀察到對象的結(jié)構(gòu)和細節(jié),這就是電
子染色或電鏡樣品的染色。
常用的染色技術(shù)有正染色和負染色兩種。
利用重金屬鹽類能與某些生物物質(zhì)發(fā)生特異的作用,某些結(jié)構(gòu)
對電f的透過能力減低,與樣品的背景淺色相比顯示暗包,從而加
強了有關(guān)結(jié)構(gòu)的反差,這種技術(shù)稱作正染。具體操作基本如下:取
一滴提純樣品的懸液用甲醛先行固定,或不先行固定,放置在覆有
火棉膠膜的載網(wǎng)上,經(jīng)短時間后用水或懸浮材料的溶液洗滌,然后
把載網(wǎng)浸入重金屬鹽溶液,再用蒸餾水洗滌,移置存濾紙片卜^去
除多余的液體∞引。這樣制備的樣品在觀察時,由于溶液中的重金
屬離f與所觀察材料的特定物質(zhì)相互作用,增強了電r散射。
負染技術(shù)也是利用重金屬增加反差的一一種手段,在喑的背景
中可以觀察到淺色的對象和它們的結(jié)構(gòu)細節(jié)。常
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