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培養(yǎng)基培養(yǎng)生物的目的是分離提純、培養(yǎng)和保存
(一)掌握常規(guī)培養(yǎng)基的配制。
(二)了解培養(yǎng)基配制過程各環(huán)節(jié)的要求和注意事項。
(三)掌握高壓蒸汽滅菌技術(shù)。
(四)掌握普通微生物接種與培養(yǎng)。
基本原理
正確掌握培養(yǎng)基的配制是從事環(huán)境生物技術(shù)工作的重要基礎(chǔ)。
培養(yǎng)基由所培養(yǎng)生物體生長所需營養(yǎng)成分與基質(zhì)(如水、瓊脂等)按
特定比例組成。由于生物種類和代謝類型的多樣性,每種生物體生
長所需營養(yǎng)成分不一樣,所以用于培養(yǎng)生物所需的培養(yǎng)基種類也很
多。盡管各種培養(yǎng)基配方和配制方法各有差異,但一般培養(yǎng)基的配
制程序卻大致相同,例如器皿的準(zhǔn)備、培養(yǎng)基的配制與分裝、棉塞
的制作、培養(yǎng)基的滅菌、斜面與平板(plates)的制作和培養(yǎng)基的無
菌檢查等大致相同。
使用培養(yǎng)基培養(yǎng)生物的目的是分離提純、培養(yǎng)和保存所培養(yǎng)的生物
物種,這就要求培養(yǎng)基既要具有培養(yǎng)物正常生長繁殖所需組分,同
時要求培養(yǎng)基中不存在其它活的生物體。因此,培養(yǎng)基配好后,一
定要殺死其中的生物體,最常用的方法是高壓蒸汽滅菌(autoclavi
ng)和超微過濾(ultrafiltration)除菌。對于耐高溫高壓穩(wěn)定性強
的物質(zhì)都可以采用高溫蒸汽技術(shù)殺死其中活生物體,而對于不耐高
溫高壓、穩(wěn)定性不高的物質(zhì),采用超微過濾除菌技術(shù)。
試劑與器材
(二)儀器
天平、pH計(或用pH試紙代替)、磁力攪拌器、高壓蒸汽滅菌
鍋。
(三)玻璃器皿
移液管、試管、燒杯、量筒、錐形瓶、培養(yǎng)皿、玻璃漏斗等。
(四)其它物品
藥匙、稱量紙、pH試紙、濾紙、記號筆、棉花、紗布、線繩、塑料
試管蓋、牛皮紙、報紙等。在條件好時,可以使用一次性錫紙代替
報紙。
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