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厭氧微生物在自然界中分布廣泛,種類繁多
厭氧微生物在自然界中分布廣泛,種類繁多,由于厭氧微生物對
氧敏感,所以在厭氧微生物分離和培養(yǎng)中,要根據(jù)微生物耐受氧氣
的程度,創(chuàng)造一個適當(dāng)?shù)臒o氧環(huán)境。目前已建立了各種厭氧微生物
培養(yǎng)技術(shù),其中有些操作較復(fù)雜,對實驗儀器要求也較高,如主要
用于嚴(yán)格厭氧菌分離和培養(yǎng)的Hungate技術(shù)和厭氧手套箱等。而有
些操作相對簡單,適用于那些厭氧要求相對較低的一般厭氧菌的培
養(yǎng),如堿性焦性沒食子酸法、厭氧罐法、庖肉培養(yǎng)基法等。本實驗
介紹后三種厭氧培養(yǎng)技術(shù)。
(一)堿性焦性沒食子酸法
焦性沒食子酸(pyn訓(xùn)ic acid)在堿性條件下形成易被氧化的(二)
厭氧罐培養(yǎng)法
1.在兩塊肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基平板上同時劃線接種巴氏芽孢
梭菌和熒光假單孢菌,并作好標(biāo)記。其中一個平板置于厭氧罐的培
養(yǎng)皿支架上,然后放入?yún)捬跖囵B(yǎng)罐內(nèi),而另一個平板直接置30℃溫
室培養(yǎng)。
2.將已活化的催化劑倒入?yún)捬豕薰奚w下面的多孔催化劑小盒
內(nèi),旋緊。厭氧罐培養(yǎng)法中的催化劑是將鈀或鉑經(jīng)活化處理的催化
劑,在常溫下即具有催化活性,可反復(fù)使用。每次使用后把催化劑
置于140。160'E的烘箱內(nèi)烘1。2h,使其重新活化,然后密封好放
在干燥處。
3.剪開氣體發(fā)生袋的一角,置于罐內(nèi)金屬架的夾上,再向袋
中加入約lOmL水。迅速剪開指示劑袋,使指示條暴露,并立即放入
罐中。指示條被還原時為無色,被氧化時為藍(lán)色。必須在作好準(zhǔn)備
工作后再往氣體發(fā)生袋中加水,并迅速密閉厭氧罐,以避免產(chǎn)生的
氫氣過多外泄,導(dǎo)致罐內(nèi)厭氧環(huán)境建立的失敗。
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