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本文標(biāo)題:"昆蟲樣品結(jié)構(gòu)培養(yǎng)基的無菌培養(yǎng)-圖像生物顯微鏡"

新聞來源:未知 發(fā)布時(shí)間:2017-2-7 14:54:20 本站主頁地址:http://www.y7853.cn

昆蟲樣品結(jié)構(gòu)培養(yǎng)基的無菌培養(yǎng)-圖像生物顯微鏡

  樣品的處理

  昆蟲體壁尚未生長出菌絲之前的新鮮蟲尸可用5%次氯酸鈉或0.1
%的升汞溶液進(jìn)行表面消毒。首先將病蟲浸入95%的乙醇中.立即取出
在火焰上燒去蟲毛和鱗片,然后浸入70%的乙醇中3—4秒,去掉蟲尸表
面的氣泡,使體壁充分潤濕.然后浸入消毒液(次氯酸鈉或升汞)中,消
毒處理1分鐘,取出蟲尸,用滅菌水沖洗3—4次。但小型昆蟲蟲尸則不
宜進(jìn)行表面消毒。

  經(jīng)表面消毒的蟲尸可立即分離,也可置于載片上蔣放入無菌培養(yǎng)皿
內(nèi)保濕培養(yǎng)(皿底放濕潤濾紙),待生長出分生孢子梗和分生孢子后再行
分離。昆蟲體壁已形成大量分生孢子的蟲尸,不再適宜進(jìn)行表面消毒,
這樣的分離材料,可以直接向培養(yǎng)基上抖落或用分生孢子劃線分離。

  分離操作

  經(jīng)表面消毒的蟲尸可以立即置于無菌盤內(nèi)解剖,取小塊感病組織,
接入有適宜培養(yǎng)基的無菌培養(yǎng)皿內(nèi)(組織分離法)。

  被嚴(yán)重污染的蟲尸分離病原真菌較困難,可反復(fù)用劃線分離法直到
純化為止。也可取蟲尸體表的孢子用無菌水稀釋后滴在培養(yǎng)基上,再用
玻璃刮鏟涂抹分散開或用抑制細(xì)菌和其他非目標(biāo)真菌的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)
行分離。

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