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樣品土壤顆粒貼在培養(yǎng)皿蓋蟲霉類真菌分析
顯微鏡
蟲霉類真菌具有彈射分生孢子的特性,利用這種性質(zhì),可以將蟲尸
懸掛在培養(yǎng)基上方,或把蟲尸粘貼在培養(yǎng)皿蓋上,待釋放少量孢子后,
更換皿蓋,進(jìn)行培養(yǎng),此種方法�?色@得純種分離。蟲霉中的蛙糞霉屬
和耳霉屬具較強(qiáng)腐生性,易自土壤及兩棲和爬行動物的腸道和糞便中分
離出來。先在滅菌培養(yǎng)皿內(nèi)倒入適宜的培養(yǎng)基(可用薩氏葡萄糖瓊脂培
養(yǎng)基),將分離的樣品(土壤顆粒等)貼在培養(yǎng)皿蓋上.待樣品中的孢子
彈射后,更換皿蓋,進(jìn)行培養(yǎng)。
冬蟲夏草的蟲尸經(jīng)表面消毒后,應(yīng)選取胸足以前部分進(jìn)行分離。先
切去外皮,取血腔中的菌核,切成米粒大小,接入平板培養(yǎng)基中。以子
座為分離材料時,可自其頭部切下,表面消毒后取中央部位組織切成小
塊進(jìn)行分離。分離的平皿置于1 5一18 C中培養(yǎng),待菌落長出后,再自
菌落邊緣挑取少量菌絲體轉(zhuǎn)入三角瓶中的固體培養(yǎng)基中培養(yǎng),以誘發(fā)子
座。子囊孢子的分離則是取前述已采集到子囊孢子的紙袋,浸入25%的
葡萄糖液中,洗下子囊孢子.在1 5—19 C、下培養(yǎng),每天鏡檢,當(dāng)孢
子發(fā)芽時,吸取兩個以上的子囊孢子滴于平板培養(yǎng)基中培養(yǎng)。
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