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石蠟切片
石蠟切片一般用于真菌侵染昆蟲后的組織病理學研究,取材實際上
是針對昆蟲而言,選擇不同的感染階段的病蟲,根據常規(guī)方法麻醉、固
定。在觀察蟲草屬等子囊菌子囊殼著生位置及子囊形態(tài),以及座殼孢等
半知菌的子座中分生孢子器的形態(tài)時,也需進行切片。使用冰凍切片法
可用經過固定的或新鮮材料直接進行切片,從而省去包埋等一切繁雜手
續(xù)和時間,能夠迅速得到觀察結果;而石蠟切片法雖較繁瑣,卻是國內
最常用的方法。
蟲生真菌及真菌病蟲尸石蠟切片法的步驟與其他材料的切片法基本
相同,都要經過如下步驟:固定一沖洗(從各種固定液取出后)一脫水(
在逐漸加濃的酒精中)一透明一浸蠟透入(用包埋劑)一包埋一切片一貼
片(粘附切片于載玻片上)一脫蠟一復水(經各級酒精下降至水)一染色與
復染一脫水一透明一封藏�?蓞⒖家话愕募毎麑W技術、生物顯微或生物
切片技術,以及植物病理學技術方面的文獻。不同之處在于染色劑及染
色方法。固定時可將菌體或蟲尸直接投入Bouin、Bouin—Duboscq、Car
noy或其他固定液中;如系感病活蟲,可先用醚或投入60℃熱水5分鐘讓
其麻醉,切成小塊(橫切或縱切),然后用固定液固定。固定時間一般在
3—7天。
顯微攝影
在蟲生真菌的鑒定、分類及其他各方面的研究中,常需記載在顯微
鏡里所觀察到的形態(tài)。借助顯微描繪儀繪制線條圖是常用的方法,特別
是半知菌類的復雜產孢結構,用黑白線條圖一般比用顯微照片更清晰。
但鞭毛菌、接合菌的形態(tài)很難用線條圖表示,而組織病理學的研究尤其
需用顯微照片表示。至于各類真菌細胞內外的超微結構,更是非用電鏡
照片不可。
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