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蚊細胞與哺乳動物的細胞由于物種分子生物學
近年應用分子生物學方法對蚊蟲進行分類研究具有準確、靈敏
的優(yōu)點,是蚊蟲分類可靠的方法,但大部分方法都要先連二飛蚊蟲
灼基因文庫,然后隊大量的重組體中篩選,工作量很大,而且具有
一定盲目性。
近年發(fā)展起來的作為分子遺傳與細胞遺傳之間橋梁的微細胞遺
傳學(microcytogenetics),是染色體顯帶與顯微切割,微克隆技
術(shù)的一門新學科,在人類遺傳學中已日益廣泛地應用于疾病的診斷
,逆向遺傳學研究,基因的精細定位及制圖等方面。
染色體顯帶與顯微切割微克隆技術(shù)的結(jié)合可以建立特定染色體
及亞帶特異性文庫,從而使我們用極少的篩選便可得到理想的克隆
。
具有分類價值的高度重復序列DNA分布在異染色質(zhì)區(qū),即C陽性
帶區(qū)。rRNA基因則分布在NOR部位,對比部分進行顯微切割、體外
擴增和微克隆是獲得理想探針的們便,快速,有效的方法。
蚊細胞間期PCC技術(shù)的應用,提高了染色體的分辨率,方便了
精細區(qū)帶的切割。同時顯微切割也可結(jié)合多線染色體進行,多線染
色體的膨大區(qū)域有轉(zhuǎn)錄活性,對某些目的基因的克隆具有良好的應
用前景。
蚊細胞與哺乳動物的細胞由于物種的屏障與細胞特性造成的多
方面的差異,使融合較為困難。提高兩種細胞的接觸機率,使之在
促融劑作用下融合尤為重要。因此合理調(diào)整兩種細胞的配比,是提
高異相細胞融合的有效途徑。分裂相的CHO細胞過多,引起自身融
合,間期蚊細胞過多,則較少見到融合,不同的蚊細胞由于大小形
態(tài)等方面的差異,所需的配比也不一致,需加以摸索。
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