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本文標(biāo)題:"分配層析和親和分配在DNA純化中的應(yīng)用"

新聞來(lái)源:未知 發(fā)布時(shí)間:2017-3-3 23:48:27 本站主頁(yè)地址:http://www.y7853.cn

分配層析和親和分配在DNA純化中的應(yīng)用

    染色體和核蛋白  二醇系統(tǒng)分離染色體脫氧核蛋白,通過(guò)單步
分配獲得了不同的非組蛋白/DNA比的核蛋白的部分分離。用逆流
分配制作了脫氧核蛋白組分的譜線。
    Pianev等(1979)研究了染色體的分配。用帶電荷聚乙二醇(帶
負(fù)電S-PEG或帶正電TMA-PEG)能將染色體從一相轉(zhuǎn)移至另一相。發(fā)
現(xiàn)了一定的選擇性。
    此操作的含義指的是將一相用另一相萃取多次,通過(guò)改變萃取
相的組成就能有選擇性地將混合物中不同組分一個(gè)接一個(gè)地萃取出
來(lái)。在第四章中已討論過(guò)的確定分配系數(shù)的各種不同因素,如離子
組成、聚合物濃度、萃取相中聚合物分子量和溫度等會(huì)引起分配系
數(shù)改變,也可采用萃取相聚合物(一般為PEG)的電性如帶電荷PEG或
在PEG上接有疏水性及生物專一性基團(tuán)來(lái)引起分配系數(shù)的變更。對(duì)
膜蛋白的情況可用去污劑來(lái)完成上述作用。
   細(xì)菌提取液的萃取曲線。大腸桿菌首先分配于含有高濃度NaCI
的葡聚糖—聚乙二醇相系統(tǒng),此時(shí)核酸分配于下相,而蛋白質(zhì)則分
配于上相。每用一新的萃取液時(shí)其中NaCl的含量是遞減的,四步萃
取后,用不含NaCI的上相,然后再用合適離子組成的上相來(lái)萃取DN
A和高分子RNA。

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