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本文標(biāo)題："電泳分離得到的蛋白質(zhì)能夠直接通過凝膠染色顯色"
新聞來源：未知 發(fā)布時(shí)間：2017-3-10 23:38:31 本站主頁地址：http://www.y7853.cn
電泳分離得到的蛋白質(zhì)能夠直接通過凝膠染色顯色
過程分別以電荷和分子大小為基礎(chǔ)分離蛋白質(zhì)，從而能夠在單一的
雙向凝膠中分辨幾千種蛋白質(zhì)。單元7．3中闡述了利用雙向等電聚
焦／SDS-PAGE分離蛋白質(zhì)的一些方法。除此之外，這一單元還介紹
了一種雙向非還原／還原電泳的方法，即蛋白質(zhì)在第一向非還原條
件下和第二向還原的條件下進(jìn)行sD孓PAGE的分離。這一類型雙向凝
膠電泳能夠分析分子內(nèi)含有二硫鍵的多種蛋白質(zhì)復(fù)合物。這兩類雙
向凝膠電泳既可作為分析，又可作為制備之用。為進(jìn)一步分析或純
化蛋白質(zhì)，也可用單向IEF平板凝膠進(jìn)行蛋白質(zhì)的分離。
聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)的局限性是蛋白質(zhì)的分子質(zhì)量
要小于300 000Da。大的蛋白質(zhì)或多種蛋白質(zhì)復(fù)合物的電泳分離需
要使用其他的凝膠基質(zhì)。瓊脂糖是比較合適的基質(zhì)，它普遍用于DN
A的分離。利用瓊脂糖凝膠電泳分離蛋白質(zhì)的方法。除了能夠分離
非常大的蛋白質(zhì)，這些方法還能分析多聚物或聚合體。雖然這些過
程也能夠通過蔗糖梯度離心(單元6．2)或凝膠過濾(單元6．3)進(jìn)行
分析，但是瓊脂糖凝膠電泳更便于對(duì)大量的樣品進(jìn)行分析。
電泳分離得到的蛋白質(zhì)能夠直接通過凝膠染色顯色。對(duì)四種基
于不同原則的對(duì)凝膠中的蛋白質(zhì)染色的方法進(jìn)行了介紹。這些染色
過程包括考馬斯亮藍(lán)染色、銀染、SYPR0 ruby染色和鋅染。這一節(jié)
介紹了基本的實(shí)驗(yàn)方法并對(duì)如何選擇高效的方法提供了指導(dǎo)。
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