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本文標(biāo)題："用光密計量學(xué)定量影像和用磷光成像在凝膠中直接檢測"
新聞來源：未知 發(fā)布時間：2017-3-10 23:38:45 本站主頁地址：http://www.y7853.cn
用光密計量學(xué)定量影像和利用磷光成像在凝膠中直接檢測
單元7．7介紹了免疫印跡的實驗方法(也稱為Western blottin
g)。在該技術(shù)中，通過單元7．1中所述電泳技術(shù)分離得到的蛋白質(zhì)
被電泳轉(zhuǎn)移到一個薄膜之上(“電印跡”)，該薄膜就成為聚丙烯酰
胺凝膠的一個復(fù)本，隨后用帶有特定蛋白抗體的探針進行檢測。一
抗可通過和125I標(biāo)記的二抗或蛋白質(zhì)A一起孵育，自顯影后顯像(單
元7．8)。近年來，放射性碘標(biāo)記抗體方法已逐漸被非放射性的酶
偶聯(lián)抗體如堿性磷酸酶或辣根過氧化酶(單元4．4)方法所取代，通
過酶作用于底物將其轉(zhuǎn)化為有色、發(fā)光或具有熒光的物質(zhì)。非放射
性的方法與放射性的方法具有一樣的敏感性，其更大的優(yōu)勢在于不
需要在使用放射性時進行特別的防護。非放射性的檢測是現(xiàn)今肉眼
觀察免疫印跡蛋白質(zhì)的可行方法。非放射性方法的缺點是它們檢測
的線性范圍比較狹窄，同時該方法必須要求精確的蛋白質(zhì)定量，可
能也是該技術(shù)存在的另一個問題。
如何利用放射性自顯影的方法使電泳分離的放射性標(biāo)記的蛋白
質(zhì)和碘標(biāo)記抗體或蛋白質(zhì)A免疫印記檢測到的蛋白質(zhì)顯像的方法。
該技術(shù)利用放射源發(fā)出的射線使光學(xué)膠卷顯影以達到顯像的目的。
在該技術(shù)中，可采取增強顯示或使用發(fā)光化合物的方法提高敏感度
，使放射性吸收基團發(fā)光從而形成影像。這一節(jié)介紹了幾種不同放
射源自顯影的檢測方法，以及用增強顯示或使用熒光以增強信號的
方法利用光密計量學(xué)定量影像和利用磷光成像在凝膠中直接檢測和
定量放射性樣品的方法
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