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本文標(biāo)題："細(xì)胞牽引力細(xì)胞在遷移過程中對(duì)底物產(chǎn)生牽引力"
新聞來源：未知 發(fā)布時(shí)間：2017-3-16 17:25:15 本站主頁地址：http://www.y7853.cn
細(xì)胞牽引力細(xì)胞在遷移過程中對(duì)底物產(chǎn)生牽引力
細(xì)胞牽引力細(xì)胞在遷移過程中對(duì)底物產(chǎn)生牽引力，這種牽引力可在
整個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞局部下面檢測(cè)。基本方案1 檢測(cè)細(xì)胞在起皺底物上的
牽引力材料目的細(xì)胞對(duì)目的細(xì)胞專用的培養(yǎng)液，不含酚紅，添加20～50
mmol／L HEPES二甲聚硅氧烷無酚紅培養(yǎng)液，用家用真空器除氣顯微鏡
載物臺(tái)溫度控制系統(tǒng)(或頭發(fā)吹風(fēng)機(jī)和控制器)蓋玻片，用酸洗過Petri
皿，比蓋玻片稍大配有錄像系統(tǒng)的倒置顯微鏡(裝有長(zhǎng)距離工作目鏡)或
正置顯微鏡(裝有多液體浸漬目鏡)顯微操作儀(可作三維調(diào)節(jié)，如Nanis
hige)，裝有持針器(World Precision In—struments)已校準(zhǔn)的微型針
計(jì)算機(jī)，裝有合適的電視圖像捕獲卡和圖像分析軟件(如NIH Image，可
用匿名Macintosh計(jì)算機(jī)，裝有Scion圖像捕獲運(yùn)行器1．將二甲聚硅氧
烷液注于干凈的蓋玻片上，擴(kuò)展形成一薄層，厚20～50微米。將本生燈
爐頭的燃料氣體量調(diào)至最小。然后，將蓋玻片的二甲聚硅氧烷液面朝下
，用鑷子夾持蓋玻片，使蓋玻片穿過火焰上部約1．5s。交聯(lián)時(shí)間會(huì)影
響二甲聚硅氧烷片的硬度。本方法的典型交聯(lián)只發(fā)生在二甲聚硅氧烷液
的最上層(厚1微米)。聚硅氧片自然形成許多皺褶，變得不透明。但是
，聚硅氧片冷卻時(shí)，在5～20s內(nèi)變得透明。*厘沲，運(yùn)動(dòng)黏度單位。2．
如果細(xì)胞不是在室溫條件下培養(yǎng)，在用于測(cè)量的顯微鏡載物臺(tái)上調(diào)整好
細(xì)胞培養(yǎng)溫度。3．用不含酚紅且添加20～50 mmol／L HEPES的常用培
養(yǎng)液接種細(xì)胞或分離原代細(xì)胞。4．如果細(xì)胞可以傳代，用胰蛋白酶和E
DTA混合液輕度消化細(xì)胞(單元1．1)，從而自培養(yǎng)器皿內(nèi)取出細(xì)胞。然
后，加入較多的添加HEPES和血清(或BSA)的除氣無酚紅培養(yǎng)液，使胰蛋
白酶失活。用同樣培養(yǎng)液混懸細(xì)胞。5．將蓋玻片放入Petri皿(稍大于
蓋玻片)，液體面朝上。向Petri培養(yǎng)皿加入除氣培養(yǎng)液，深度≥o．5 c
m。
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