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蛋白質(zhì)不同于氨基酸等離子點和等電點一般不一致
蛋白質(zhì)不同于氨基酸,其等離子點和等電點一般是不一致的。因為
,按定義等離子點是蛋白質(zhì)分子由于堿性基團(tuán)與質(zhì)子結(jié)合以及酸性基團(tuán)
與質(zhì)子解離而分別形成的陽性基團(tuán)和陰性基團(tuán)數(shù)目相等時的pH。相反,
等電點是蛋白質(zhì)在電泳中不移動時的pH。為了確定等電點,蛋白質(zhì)必須
溶解在一個緩沖的介質(zhì)中,這種介質(zhì)含有小分子量的陰離子和陽離子,
它們能與多重離子化的蛋白質(zhì)結(jié)合。因此,在等電點時所觀察到的電荷
平衡,部分地是由于在這pH時游離的陰離子(或陽離子)比結(jié)合的陽離子
(或陰離子)多。這可能掩蓋了實際上在蛋白質(zhì)上電荷的不平衡。
實際上,蛋白質(zhì)分子總是在緩沖液中進(jìn)行研究的;因此,這樣的等
電點是很重要的。例如,在這pH時蛋白質(zhì)的溶解度最小,因為在這時相
鄰分子帶相反電荷的基團(tuán)之間吸引的機(jī)會最大,而導(dǎo)至聚集,很容易沉
淀。
蛋白質(zhì)溶液中加入硫酸銨一類的鹽也能夠引起蛋白質(zhì)分子的聚集,
并因此而沉淀。蛋白質(zhì)分子和無機(jī)離子由于水合作用,互相競爭水分子
。在一個特殊的鹽濃度時,蛋白質(zhì)一蛋白質(zhì)之間的相互作用超過了蛋白
質(zhì)一水之間的相互作用,并發(fā)生了聚集和沉淀。這個技術(shù)廣泛地應(yīng)用于
蛋白質(zhì)的初步純化。用電泳的方法來分離蛋白質(zhì)也是利用了各種蛋白質(zhì)
分子在等電點上的區(qū)別。
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