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混合物中分離和純化一種或幾種生物化合物
層析的一般原理
生物化學(xué)家經(jīng)常面臨著的一個問題是從一個混合物中分
離和純化一種或幾種生物化合物。要進行這樣的分離,最方
便的方法之一是使用層析技術(shù)。這種技術(shù)能用于分離大量
(幾克)的或小量(微微克)的物質(zhì)。為了得到一個分離,對一
種特殊層析形式的選擇取決于待分離的物質(zhì),而且為了純化
一種化合物往往可以相繼地使用幾種層析方法。自從層析法
成為一種分析技術(shù)以來,很多改進的和新的方法已經(jīng)被使用,
從而擴大了這種技術(shù)的范圍。在以下幾節(jié)中概括了目前正在
使用的一些主要的層析技術(shù)。
“分配系數(shù)”這個術(shù)語通常被用來敘述一種化合物在互不
相溶的兩個相中分配的狀況。一個化合物在兩個特定的溶劑
中分配,在特定的溫度時這個系數(shù)的值是一個常數(shù)
一個化合物的分配不僅可以按它在二種溶劑中的分配
來描述,而且也可以通過它在任何兩個相中的分配來描述,如
固相一液相或氣相一液相等。因此,如果一種物質(zhì)在硅酸和苯
之間的分配系數(shù)是0.5的話,這就是說這種物質(zhì)在苯中的濃
度是硅酸中的二倍。分配系數(shù)的概念是層析法的基本原理。
對于層析來說,分配系數(shù)很方便地可以定為移動相中的濃度
除以固定相中的濃度。
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