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許多細(xì)菌表面的多糖物質(zhì)-菌體分析
顯微鏡
染液染成紅色ZiehI-Neelsen抗酸染色法
Ziehl—Neelsen抗酸染色法(The Ziehl—NeelsenAcid—Fast St
ain)是從Paul Ehrlich 1882年發(fā)明的染色法改進(jìn)得到的。該染色
法本來(lái)是用于檢測(cè)引起肺結(jié)核和麻風(fēng)病的分支桿菌(Mycobacterium
)。在固定了微生物的載玻片上覆蓋石炭酸品紅(carbolfuchsin)液
并加熱、漂洗,然后用含3%鹽酸(HCl)的95%乙醇液脫色,再次漂
洗,并用Loeffer氏亞甲基藍(lán)染色。大多數(shù)細(xì)菌經(jīng)脫色會(huì)除去石炭
酸品紅染料。然而,那些抗酸菌會(huì)保留亮紅色。這種性質(zhì)是由于這
些細(xì)菌細(xì)胞壁中的脂質(zhì)成分造成的。非抗酸菌將失去紅色,而被Lo
effer氏亞甲基藍(lán)復(fù)染液染成藍(lán)色。特殊染色方法
負(fù)染法(Negative Staining)當(dāng)標(biāo)本本身或其中一部分,比如
莢膜,不吸收染料,那么就可以采用負(fù)染法。莢膜是一層包圍在許
多細(xì)菌表面的多糖物質(zhì),起到保護(hù)宿主的屏障作用。它同時(shí)也阻止
了染色。在負(fù)染中,微生物周圍背景充滿染料,如墨汁或黑色素(n
i—grosin)等酸性染料。染色結(jié)果并未使菌體本身著色,而使其在
暗色背景下保持透亮。接著用簡(jiǎn)單染色或復(fù)合染色來(lái)顯現(xiàn)出莢膜內(nèi)
的細(xì)胞。這樣,典型的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是暗背景,透亮莢膜,莢膜內(nèi)是被
結(jié)晶紫染成的紫色細(xì)胞或被亞甲基藍(lán)染成的藍(lán)色細(xì)胞。
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