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本文標(biāo)題："纖維素作為碳源培養(yǎng)基來篩選生長萄糖苷酶基因"
新聞來源：未知 發(fā)布時間：2017-8-30 3:08:59 本站主頁地址：http://www.y7853.cn
纖維素作為碳源培養(yǎng)基來篩選生長萄糖苷酶基因
葡聚糖酶活性的檢測卜落在可溶纖維素[CMC)的瓊脂上土長，
能合成相分泌內(nèi)識葡聚糖酶蛇菌
落周圍產(chǎn)生黃暈環(huán)(白斑處)
這項(xiàng)技術(shù)已經(jīng)成功地應(yīng)用于從鏈霉菌、梭狀菌、嗜熱厭氧菌、
嗜熱單胞菌、伊文桿菌、假單胞菌、纖維弧菌、瘤胃球菌、纖維單
胞菌、纖維狀細(xì)菌和桿菌等中分離出內(nèi)切葡聚糖酶基因，
沒有一種平板篩選方法可以很方便地檢測克隆了外切葡聚糖酶
基因的細(xì)胞，因此應(yīng)用免疫學(xué)方法來檢測表達(dá)外切葡聚糖酶的重組
子。雖然需要與目的蛋白相對應(yīng)的特異性抗體，但這種方法不需要
分泌蛋白就可以檢測出來。先將重組細(xì)胞原位裂解．如暴露于氯仿
蒸氣中，再將細(xì)胞質(zhì)蛋白轉(zhuǎn)入尼龍膜或硝化纖維膜以便進(jìn)行免疫測
試。檢測中，復(fù)制平板宋保證細(xì)胞進(jìn)一步利用和繁殖。
將子葡萄糖苷酶的基因庫轉(zhuǎn)化大腸桿菌，分離原核生物的廬葡
萄糖苷酶基因。通過纖維素作為惟一碳源的基本培養(yǎng)基來篩選生長
的轉(zhuǎn)化子，表達(dá)子葡萄糖苷酶的克隆利用顯色底物來鑒定
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