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本文標題:"采用懸浮培養(yǎng)細胞實驗-培養(yǎng)皿用倒置顯微鏡"

新聞來源:未知 發(fā)布時間:2018-1-30 0:31:17 本站主頁地址:http://www.y7853.cn

采用懸浮培養(yǎng)細胞實驗-培養(yǎng)皿用倒置顯微鏡

     在軟瓊脂上的克隆化生長
    盡管單層培養(yǎng)克隆化可應(yīng)用于從腫瘤直接培養(yǎng)的細胞,但近年
的大多數(shù)報告均采用懸浮培養(yǎng)克隆化以減少具有貼壁依賴性的基質(zhì)
細胞的生長。克隆形成檢測具有理論上的優(yōu)點,即僅在具有很強的
自我更新能力的細胞(可能是腫瘤細胞)中檢測反應(yīng),而對增殖能力
有限的細胞,它構(gòu)成腫瘤的主體,則不檢測。然而,這僅在細胞集
落是真正的克隆的時候才行,并且僅在細胞克隆生長許多代以后才
進行。遺憾的是,實際情況并非總是如此�?寺⌒纬陕释ǔ�0.o
l%一o.1%,它可能很難排除細胞團的出現(xiàn)。當單層克隆化細胞
可獲得10代(一1000個細胞)時,懸浮克隆通常在4—6代后(16—64
個細胞)才可獲得。假定其中的一些克隆從3—4個細胞的細胞團開
始,那么,傳代次數(shù)低到2次及細胞的自我更新能力就很值得懷疑
。-  但是1在軟瓊脂上的生長確定是對細胞系有用的系統(tǒng),它具有
較高的接種率。但使用取自病人的實體瘤和滲出物進行實驗則已碰
到許多技術(shù)問題,它仃1影響對結(jié)果的解釋。這些問題包括:較難
從表皮瘤獲得純的細胞懸液(這是克隆化生長概念的先決條件);接
種率很低(《1%);在某種生長條件下,貼壁依賴細胞形成克�。�
需要大量的細胞;以及克隆計數(shù)上帶有一定程度的主觀性等。這些
代表著現(xiàn)有技術(shù)的失敗而并非檢測方法的失敗。已有作者強調(diào)過分
離和選擇適于不同類型腫瘤細胞的生長培養(yǎng)液的最佳方法的重要性

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