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涂布平板時,通常孢子懸液涂布平板培養(yǎng)皿
用鏈霉菌孢子懸液涂布平板
鏈霉菌抱子(甚至菌絲片段)具有良好的抗?jié)B透壓破壞的能力
,可直接從20%甘油或濃蔗糖溶液中用蒸餾水配制稀釋液。
對于精確的研究工作?我們通常分別吸取0.5或lml孢子懸液
加到4。5或9ml水中稀釋10倍。如果吸取的量很精確,每次稀釋后
都充分混勻,也可將0.1ml孢子懸液加到o.9ml水中稀釋(當然每
次稀釋都要更換新的吸管)。0.1ml的孢子懸液也可加到9.9ml水
中稀釋100倍。
涂布平板時,我們通常在每個標準培養(yǎng)皿中加o.1ml孢子懸
液,然后用玻璃刮鏟涂勻。當做一系列相同稀釋度或較低稀釋度(
即餃濃的孢子懸液)的稀釋時,刮鏟上攜帶的孢子可以忽略不計,
此時使用同一個刮鏟可節(jié)省時間(通常當平板培養(yǎng)基是含不同生長
因子的選擇培養(yǎng)基時,不能使用同一刮鏟,因為刮鏟上所沾帶的
微量生長因子足以導致“背景”生長)。
欲要求菌絲具有濃密地坪狀生長,如當需要觀察麻點(pock)
或做平板雜交時,通常在涂布完平板后,將平板置于超靜工作臺
上吹干水份(如果涂布平板前吹干平板,會使孢子懸液很快吸入乎
板,導致塊狀生長區(qū)的出現(xiàn))。如果要得到分離的菌落,比如說雜
交后要獲得單個分離的重組子,通常在涂布平板后沒有必要吹干
平板,只要將平板正面朝上培養(yǎng)約一天即可。
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