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本文標(biāo)題："酵母菌和霉菌瓊脂培養(yǎng)基過夜培養(yǎng)分析顯微鏡"
新聞來源：未知 發(fā)布時(shí)間：2018-9-17 23:12:04 本站主頁地址：http://www.y7853.cn
酵母菌和霉菌瓊脂培養(yǎng)基過夜培養(yǎng)分析顯微鏡
疏水格柵濾膜過濾器
疏水格柵濾膜過濾(hydrophobic grid membrane filter，HGMF)技術(shù)
是由Sharpe和MichaudE¨8’¨9]發(fā)明，隨著它被進(jìn)一步的發(fā)展，用于各種
食品中微生物的檢測(cè)計(jì)數(shù)。這種方法使用了一個(gè)特殊構(gòu)造的過濾器，在這
種膜過濾器的一面包含了1 600個(gè)蠟狀的格柵，每一個(gè)格柵都能夠限制菌落
的生長(zhǎng)和大小。每一個(gè)膜過濾器，可以利用MPN自動(dòng)計(jì)數(shù)口…，計(jì)數(shù)范圍在
(10～9)×101。這種方法能夠檢測(cè)的細(xì)胞下限數(shù)為10／g，大約24 h內(nèi)完成
口“]。HGMF用于檢測(cè)計(jì)數(shù)所有的cfus和特殊的菌群凹J“”]，如真菌類(f
ungi)。17]、沙門氏菌‘”o和假單胞菌[6“。AOAC認(rèn)可了大腸菌群總數(shù)、
糞大腸菌群菌、沙門氏菌、酵母菌和霉菌的HGMF方法。用于真菌的ISO—GR
ID法，使用了一個(gè)特別的培養(yǎng)基平板：含有兩種抗細(xì)菌抗生素和錐蟲藍(lán)(tr
ypan blue)。后者使真菌菌落染成藍(lán)色，在48 h內(nèi)能夠檢測(cè)下限數(shù)值為10
cfu的菌落數(shù)。
HGMF典型的應(yīng)用是將1 mI。的1：10的樣品液通過過濾膜過濾，然后把
這個(gè)膜放置在一個(gè)適合的瓊脂培養(yǎng)基過夜培養(yǎng)，讓菌落生長(zhǎng)。用MPN法計(jì)算
生長(zhǎng)菌落的格柵。這種方法允許每張過濾膜過濾l g食品樣品[1】7]。對(duì)于
食品中大腸桿菌(E．coli)的檢測(cè)，SD-39瓊脂ISO—GRID法比4一甲基傘形
基一pD一葡萄糖苷酸(4-methylumbelliferyl一／3-D—glucuronide)瓊脂
協(xié)同LMG(1actose monensin glucur—onate)瓊脂ISO—GRID法具有更好的
通用性；盡管后者能夠靈敏地檢測(cè)大腸桿菌(E．coli)0157：H7和MUG陽性
菌株¨“。SD-39瓊脂法能夠在24 h左右產(chǎn)生結(jié)果，靈敏度<10，而LMG法需
要大約30 h。
對(duì)5個(gè)試管的大腸菌群分別進(jìn)行MPN和HGMF同步計(jì)數(shù)，大腸菌群和糞大
腸菌群在計(jì)數(shù)上具有相同的結(jié)果n…。在進(jìn)行HGMF檢測(cè)時(shí)，首先，HGMF過濾
膜被放置在胰酶解酪蛋白一黃豆瓊脂培養(yǎng)基上，35℃，培養(yǎng)4～5 h(目的是
為了修復(fù)受損的細(xì)胞)；隨后，把它移到m—FC瓊脂中再培養(yǎng)�；诿笜�(biāo)記
抗體(enzyme—labeled antibody，ELA)操作的HGMF已經(jīng)得以發(fā)展，主要用
于食品中致病性大腸桿菌0157：H7(hemorrhagic colitis，HC；出血性腸
炎)菌株檢測(cè)口26]。這種方法使用了一種特殊培養(yǎng)基平板，能夠保證HC類
型菌株在44．5℃生長(zhǎng)。這種特殊的瓊脂培養(yǎng)基僅含有0．113％#3牛膽鹽，
而HC瓊脂培養(yǎng)基中含有0．15％。該方法的能夠檢測(cè)出絞細(xì)牛肉中的大約90
％的HC類型菌株E124]。HGMF—ELA法使用HC瓊脂43。C、培養(yǎng)16 h，沖洗掉
膜上的菌落，將膜浸入單克隆抗體一一辣根過氧化物酶一蛋白A聯(lián)合體的封
閉溶液體系中。這種方法，EI。A陽性菌落呈紫色，95％的HC類型菌株能在
24 h內(nèi)測(cè)出，且在肉中的檢測(cè)到HC菌株的極限達(dá)到10 cfu／g。
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