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免疫放射分析
免疫放射分析(radioimmunoassay)對抗原進(jìn)行放射性標(biāo)記,利用標(biāo)記抗
原與特異性抗體結(jié)合,隨后利用放射性測量儀檢測與抗體結(jié)合的抗原的數(shù)
量。固態(tài)放射性免疫(solid—phase radioimmunoassay,RIA)測定是利用
單層的抗體分子與固體表面或物質(zhì)結(jié)合,使用的固態(tài)物質(zhì)有:聚丙烯、聚
苯乙烯、溴乙酰纖維素。RIA的關(guān)鍵在于被抗體包圍的聚合物可以與放射性
物質(zhì)標(biāo)記的抗原結(jié)合。當(dāng)沖洗掉游離的標(biāo)記抗原后,進(jìn)行放射性定量檢測
。試驗(yàn)中利用最多的標(biāo)記物�!�5]I。
Johnson等人u…婦改良了固態(tài)RIA,用于金黃色葡萄球菌(S.a(chǎn) b11*eb
!,S)腸毒素B的檢測,發(fā)現(xiàn)改良的RIA方法比免疫擴(kuò)散技術(shù)的靈敏度高5~20
倍。研究者發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)中使用聚苯乙烯和積分放射計(jì)數(shù)檢測,靈敏度為1~5
ng。CollinsE蚓等人在使用RIA時(shí),利用與溴乙酰纖維素相結(jié)合的濃縮抗體
檢測腸毒素B。結(jié)果發(fā)現(xiàn)RIA比免疫擴(kuò)散技術(shù)(immunodiffusion)靈敏度高10
0倍,對內(nèi)毒素B的檢測檢測水平為0.01 tlg/mI。。Collins等人從火腿
、牛乳、羊肉等多種食品提取葡萄球菌腸毒素A,利用RIA技術(shù)分析檢測,3
~4 h內(nèi)可以完成。同以前的研究者一樣,他們認(rèn)同RIA方法具有較高的靈
敏度,可以用于0.00l txg/mL的檢測;對腸毒素A的檢測,可以定量的準(zhǔn)
確度為0.01 txg/mL。
通過腸毒素的碘化作用,固態(tài)RIA技術(shù)可以檢測1 ng/g的毒素‘17]。
當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)A作為免疫吸收物用于抗原一抗體系統(tǒng)從沒有反應(yīng)的毒素中分離時(shí)
,靈敏度<1.0 ng/g的葡萄球菌腸毒素A(SEA)、SEB、SEC、SED、SEE,1
天內(nèi)可以得到結(jié)果口7‘1 4 2I。另一項(xiàng)研究中,利用蛋白質(zhì)A時(shí),可以檢
測到0.1 ng/mL的SEA、0.5 ng/mI。的SEA和0.5 ng/mI。的SEB[33;
利用雙抗體RIA技術(shù),對SEC2的檢測靈敏度為100 P91171|。
RIA技術(shù)可以用于食品及其他的生物危害的檢測,例如,內(nèi)毒素、貝類
食品中麻醉性砷中毒毒素及其他。利用¨5I標(biāo)記的同源抗體過濾器,在微
孔膜上沖洗,8~10 min內(nèi)能夠得到結(jié)果[1 98]。由于RIA技術(shù)需要同位素
以及其缺乏輕便性,目前RIA技術(shù)很少用于食品中微生物的檢測。
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