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本文標(biāo)題："利用化石材料進(jìn)行DNA分析技術(shù)-化石顯微鏡"
新聞來源：未知 發(fā)布時(shí)間：2019-3-29 4:03:24 本站主頁地址：http://www.y7853.cn
利用化石材料進(jìn)行DNA分析技術(shù)-化石顯微鏡
化石DNA的提取與甄別Edward M．G01enberg
利用化石材料進(jìn)行DNA分析時(shí)，研究范疇(而不是研究者本身)規(guī)定了研
究材料的性質(zhì)、保存時(shí)間和保存方式。上述任一因素都將影響實(shí)驗(yàn)的成敗
或者DNA保存的可能性。據(jù)報(bào)道，成功提取DNA的材料包括琥珀包埋物(Cano
ef a／．，1992；DeSalle efa／．，1992；Poinar efa／．，1993)、植
物壓膜化石(Golenberg efa／．，1990；Soltis efa／．，1992)、哺乳動(dòng)
物糞便中的植物材料(Rogers&Bendich，1985)、干燥的蠟葉標(biāo)本(Rogers&B
endich，1985)，以及考古發(fā)掘的殘留物，如空氣干燥的(Helentjaris，19
88)、炭化的(Helentjaris，1988；Horai efa／．，1991；Brown efa／．
，1994)甚至是水浸材料(Lawlor efa／．，1991)。需要指出的是，任何一
種上述材料都曾有很多從單個(gè)標(biāo)本中獲得可靠DNA失敗的報(bào)道(Sidow efa／
．，1991；Bailey ef a／．，1996； H6ss e，a／．，1996 a，b； Po
inar ef a／．，1996； Austin e，a／．，1997； Yang efa／．，19
97b)，這提示我們應(yīng)該用大量的樣本進(jìn)行研究，以增加成功的可能性。盡
管樣本的年代與保存下來的DNA片段的大小，以至DNA保存的可能性之間沒
有線性關(guān)系(陷筋o1989；Habelberg&Clegg，19915 Kelman&Moran，]996)
，但是迅速干燥年輕標(biāo)本比已水解的、非常老的標(biāo)本更能產(chǎn)生較穩(wěn)定的結(jié)
果。而且，有關(guān)古DNA的研究，目前的大部分工作集中在動(dòng)物標(biāo)本上，所以
對(duì)保存DNA的特性的了解主要來自于這些材料。然而，在動(dòng)物組織中，一般
情況下由于動(dòng)物自身存在的或者身體表面的細(xì)菌所產(chǎn)生酶的消化作用，DNA
的降解在動(dòng)物死亡后迅速發(fā)生；而在植物體內(nèi)，伴隨著組織分解(葉片脫落
、種子傳播、枝葉斷裂)，細(xì)胞的死亡并不很快發(fā)生，其內(nèi)部細(xì)菌的生長(zhǎng)也
相對(duì)較慢，因此，植物組織內(nèi)DNA降解的初始速率較慢�？偠灾参锏�
埋藏特性決定了其DNA具有較長(zhǎng)的保存時(shí)間。
在這一章中，我將描述從陳舊的植物材料中提取DNA的一般方法，討論
在古DNA研究中我們應(yīng)該特別注意的方面，提出甄別古DNA序列的方法。29
．] 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和提取技術(shù)
從化石、亞化石或者蠟葉標(biāo)本中提取DNA與從現(xiàn)代新鮮材料中提取DNA
的技術(shù)基本一致(參見Sytsma，1994)，但是進(jìn)行古DNA研究時(shí)，我們需要特
別注意以下3個(gè)方面：污染物、抑制物、微量的降解DNA。要防止任何外源
的，無論是古代還是現(xiàn)代DNA的污染，設(shè)置防止外源DNA污染的對(duì)照實(shí)驗(yàn)尤
為重要。任何時(shí)候，所有用于提取DNA的工具和材料都應(yīng)該是一次性的，需
要重復(fù)使用的器具必須放在0．5％的次氯酸鈉溶液中浸泡幾個(gè)小時(shí)，用蒸
餾水反復(fù)沖洗，然后放在短波紫外光下照射30分鐘。溶液必須首先分裝成
小體積，夠5—]o次提取即可，以防止剩余溶液所造成的隨機(jī)污染。如果條
件允許，應(yīng)
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